非特異性背景染色的常見問題和解決辦法
常見問題                                 解決辦法
操作過程中漂洗不充分           每步步驟后沖洗3次，每次5分鐘

加試劑后切片干燥               防止切片干燥

組織切片折疊                   勿取折疊處觀察染色結果

組織中所含過氧化物酶未阻斷     可再配制新鮮3％H20：封閉，孵育時間延長

組織中所含內源性生物素未封閉   使用阻斷劑阻斷內源性生物素

組織抗原 彌散                   組織及時固定，固定液要符合標準

切片黏附劑過厚                 重新配制黏附劑涂片

血清蛋白封閉不充分             延長血清蛋白封閉時間或再次用2％BSA封閉

染色過強
染色過強的常見問題和解決辦法
    常見問題                                    解決辦法
一抗濃度過高或抗體孵育時間過長          降低一抗濃度或縮短一抗孵育時間

孵育溫度過高，超過37℃  蛋白                一般室溫20～28℃

生物素化二抗或SABC-POD孵育時間過長      縮短孵育時間

DAB顯色時間過長或DAB濃度過高           顯色時間不能超過5―10分鐘，以顯微鏡下觀察為準