蜂蜜中寡糖檢測方法原理:
試樣中的高分子糖,經活性炭-硅藻土小柱的富集、濃縮,再用薄層色譜法分離、檢測。經過與麥芽五糖對照品比較,來判定蜂蜜中寡糖的存在。
樣品和試劑
對照品:麥芽五糖
供試品:純正蜂蜜、摻假蜂蜜
試劑:乙醇(分析純)、正丙醇(分析純)、三乙胺(分析純)、二苯胺(CAS:537-67-7)、丙醇(分析純)、苯胺、磷酸(優級純),超純水。
樣品處理
蜂蜜寡糖檢查柱凈化:
活化:25mL水,過柱流速1滴/秒
上樣:2g樣品溶于10mL水后,緩慢加到蜂蜜柱上
淋洗:25mL7%乙醇水,不收集淋洗液
洗脫:10mL50%乙醇水,收集洗脫液
濃縮:洗脫液于65℃水浴減壓濃縮至干
復溶:殘渣加入30%乙醇1mL,搖勻即得
注:1)整個SPE前處理過程都需要用固相萃取裝置,抽取真空度以確保流速;
2)旋蒸濃縮時*用25mL雞心瓶,防止損失樣品;可少量多次添加溶劑復溶;
3)活化過程中不能將液面抽干,否則會影響小柱對寡糖的保留效果。
薄層色譜法條件:
*TLC板:高效硅膠G薄層板(涂層厚度0.2-0.25mm),110℃活化1小時
*展開劑:正丙醇-水-三乙胺=60:30:0.7
*顯色劑:苯胺-二苯胺-磷酸混合溶液(取二苯胺lg,苯胺1ml,磷酸5ml,加丙醇至50ml,混勻)
注:顯色劑現配現用
實驗結果判定
從恒溫干燥箱中取出薄層板,觀察TLC板的顯色況,純蜂蜜只在Rf值0.35以上的區域有2-3個藍色中帶灰色或咖啡色的斑點,相比較麥芽五糖或混有麥芽五糖的蜂蜜卻是從原點開始呈現藍色帶狀樣的斑點群。
蜂蜜中蔗糖、麥芽糖檢測采用液相色譜示差檢測器檢測、 蜂蜜的相對密度檢測、水份檢測...更多的產品咨詢及購買信息敬請致電或(胡);在線咨詢請添加2749316971,公司:1256613819